01 網織紅細胞實驗原理(血液病要做血液檢驗項目有哪些)

影響網織紅細胞計數的因素有哪些

影響網織紅細胞計數標準性的因素為染液的質量、計數紅細胞的個數、染色溫度和時間、網織紅細胞的辨認水平。網織紅細胞計數：

（一）原理網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的紅細胞，胞質中尚有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質殘存，經煌焦油藍或新亞甲藍活體染色后，胞質中可見藍或藍綠色枝點狀甚至網織狀結構。

（二）方法活體染色法．近年來還可通過某些血液自動分析儀及流式細胞術檢測法進行網織紅細胞計數。

（三）參考值（活體染色法）

成人和兒童：0.005-0.015

新生兒：0.02-0.06

網織紅細胞絕對值：（24-84)×10^9/L

（四）臨床意義

網織紅細胞計數反應骨髓造血功能的重要指標。

網織紅細胞增多表示骨髓紅系增生旺盛，常見于溶貧、急性失血、缺鐵貧、巨幼貧等，網織紅細胞減少表示骨髓造血功能減低，常見于再障、骨髓病性貧血。

檢測網織紅細胞有些什么方法?如何評價?

常規采用玻片法，由于玻片法容易使混合血液中的水分蒸發，染色時間偏短，因此結果偏低。試管法容易掌握，重復性較好，被列為手工法網織紅細胞計數的參考方法。近年來，國內使用米勒窺盤進行計數，規范了計算區域，減少了實驗誤差，使結果準確性有所提高。

目前，國外逐步使用網織紅細胞儀器法測定，可自動染色、自動分析，自動打印出各階段網織紅細胞的分布圖，結果準確。

最新血細胞分析儀的應用，為網織紅細胞計數提供了更先進的測試手段，這類儀器采用熒光染色和激光測量的原理，不但能客觀地測量大量網織紅細胞，而且還能根據熒光強度，將其分為高熒光強度、中熒光強度和低熒光強度三類，這種分類法對估計化療后骨髓造血功能的恢復及骨髓移植效果有較重要的意義。

網織紅細胞計數

網織紅細胞 Miller;窺盤法;儀器法

Key words:Reticulocyte;Miller ocular;Analyzer

網織紅細胞是骨髓最新被釋放到外周血的成熟紅細胞的前提紅細胞，同成熟紅細胞相比，其細胞內仍殘存小量的RNA（嗜堿性物質），是反映骨髓造血功能的早期指標。目前測定網織紅細胞的自動分析儀主要有：多參數流式細胞儀（FCM），某些全自動血液分析儀，如：Sysmex-R系列分析儀，Miles H3型血液分析儀，Coulter Maxm型分析儀，Abbott CD3500血液分析儀[1,2]。國內多采用顯微鏡目測法。現將Sysmex-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法的測定結果進行探討。

1 材料與方法

1.1 材料

(1)SYSMEX-R3500分析儀：日本希森美康株式會社生產。原裝試劑盒和質控物，批號分別是ZA9004，11130091。(2)COULTER MAXM 分析儀：美國COULTER 公司生產。原裝試劑盒和質控物，批號分別是109155，105379K。試劑盒由試劑A與試劑B組成，其主要成分分別是0.06%新亞甲藍與0.08%硫酸。(3)Miller窺盤法的試劑盒：由TONYAR DIAGNOSTICS.INC生產的ASK BCB Solution，批號A10。成分為焦油藍4 g/L與氯化鈉9 g/L。

1.2 方法

(1)SYSMEX-R3500分析儀測定原理：熒光染料堿性槐黃（或者全胺O）（Auramine O,AO）與網織紅細胞內RNA結合，以氬激光束為光源進行測定。操作步驟：混勻血液，直接測定網織紅細胞。(2)COULTER MAXM 分析儀測定原理：血液標本與新亞甲藍孵育活體染色，加入酸性試劑，使紅細胞內的血紅蛋白溢出，保存被染色的RNA于細胞內，細胞通過測定體積，高頻傳導性以及激光散射（VCS）而進行分析，測定出網織紅細胞。操作步驟：向A管加入4滴與50 μl血液標本，混勻，室溫16℃～30℃放置5 min～60 min.取A管液體2 μl于B管，加入試劑B液2 ml，等30 s，手動進樣檢測。(3)Miller窺盤法原理：煌焦油藍活體染色法。操作步驟：見全國臨床檢驗操作規程。為了重復性好，CV值較低，本次實驗采取了計數500個紅細胞內的網織紅細胞百分數。(4)測定SYSMEX-R3500，COULTER MAXM的批內，批間精密度，并與Miller窺盤法進行比較。分別用SYSMEX-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法對130份正常人標本進行網織紅細胞測定，方差分析統計結果

一位熟練的檢驗工作人員對同一標本用Miller窺盤法重復測定15次，結果如下：均值=1.177 5(0.52～1.89)，S=0.321 9，CV(%)=27.34。

2.7 用SYSMEX-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀，顯微鏡目測法(Miller窺盤法)同時測定130份血常規在正常范圍的標本。結果F=3.87，P<0.05，差異有顯著性。差異性分析(見表6)，相關性分析(見表7)。表6 差異性分析（略）表7 直線相關性分析（略）注：※差異無顯著性，★差異有顯著性，★★差異有極顯著性，△相關。

白細胞分類計數是根據什么原理進行的

白細胞分類計數是將血液中的白細胞分類統計的一種方法，白細胞分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞共五種。

其中中性粒細胞占全部白細胞總數的50%～70%，因此中性粒細胞的增減必然影響到白細胞總數的增減。它們都有各自的特殊功能。

中性粒細胞：桿狀核1%-5%(0.04-0.5)×10/L，分葉核50%-70%(2-7)×10/L，嗜酸粒細胞：0.5%-5.0%(0.05-0.5)×10/L；嗜堿粒細胞：0%-1%(0-0.1)×10/L；淋巴細胞：20%-40%(0.2-0.4)×10/L；單核細胞：3%-8%(0.08-0.8)×10/L。

擴展資料

白細胞分類計數：

（1）中性粒細胞增多：急性化膿感染、粒細胞白血病、急性出血、溶血、手術后、尿毒癥、酸中毒、急性汞中毒、急性錯中毒等。減少：傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、化學藥物中毒，X線和輻射、抗癌藥物化療、極度嚴重感染、再障、粒細胞缺乏等。

（2）嗜酸性粒細胞增多：變態反應、寄生蟲病、某些皮膚病、某些血液病、手術后、燒傷等。減少：傷寒、副傷寒、以及應用腎上腺皮質激素后。

（3）嗜堿性粒細胞增多：慢性粒細胞白血病、霍奇金病、腫瘤轉移、鉛及鉍中毒等。

（4）淋巴細胞增多：百日咳、傳染性單核細胞增多癥、慢性淋巴細胞白血病、麻疹、腮腺炎、結核、傳染性肝炎等。減少：多見于傳染病急性期、放射病、細胞免疫缺陷等。

（5）單核細胞增多：結核、傷寒、亞急性感染性心內膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細胞白血病、急性傳染病的恢復期等。

血液病要做血液檢驗項目有哪些?

常見的貧血性血液病檢驗項目1

網織紅細胞計數(RC)：是一種非常經濟實用而又簡單的項目，對各種貧血性疾病都可要求常規檢驗RC，由RC的高低從而判斷貧血性疾病是增生性貧血還是增生低下性貧血，抑或是增生正常性貧血

2

酸溶血試驗(Ham試驗)：是陣發性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)的一種簡便的診斷方法，確診PNH時，需本試驗操作規范，有陽性對照，且兩次以上陽性

3

蔗糖溶血試驗：作用原理與酸溶血相似，陽性可見于PNH，自身免疫性溶血，遺傳性球形紅細胞增多癥以及部分再生障礙性貧血也可能是陽性

它是PNH的一個簡單的過篩試驗

4

紅細胞滲透脆性試驗：紅細胞脆性試驗反應了紅細胞的抵抗能力的大小，脆性增加常見于遺傳性球形紅細胞增多癥，也可見于嚴重的自身免疫性溶血性貧血

5

尿含鐵血黃素試驗(Rous試驗)：慢性血管內溶血腎小管上皮細胞可分解游離血紅蛋白為含鐵血黃素，沉積于上皮細胞內，在普魯士藍反應時呈陽性反應

本試驗陰性不能完全排除慢性血管內溶血

6

抗人球蛋白試驗(Coombs試驗)及分型試驗：一種古老的試驗，用于檢驗血清中的不規則抗體，自身免疫性溶血性貧血可以出現陽性反應

其分型試驗有助于進一步確定是何種不規則在干擾紅細胞的生成與破壞

7

骨髓單個核細胞抗人球蛋白分型試驗：文獻報道存在一類疾病，骨髓象以紅系增生表現，可能有少量病態造血現象，可見有原位溶血的痕跡，巨核細胞成熟受阻或巨核細胞減少;臨床表現為全血細胞減少，網織紅細胞不少，皮持激素治療有明顯效果;多發生于中青年女性，可有免疫學異常的證據，稱之為“與免疫相關的全血細胞減少癥(IRP)”

骨髓單個核細胞抗人球蛋白分型試驗是居于此類疾病而建立起來的一種新的試驗方法，原理在于骨髓中可能存在某些抗體，這些抗體可以是針對幼紅細胞的，可以針對網織紅細胞的，可以是針對幼稚粒細胞系的

8

外周血紅細胞的CD55、CD59檢驗：這是一項從分子水平確診PNH的現代診斷方法，原理為PNH患者血細胞表面不表達或少表達CD55及CD59，稱為CD55或CD59陰性細胞，此種細胞的大量存在是PNH發生嚴重溶血的分子原因所在

（療法：生物激活免疫造血療法）

原核生物蛋白質的生物合成原理是啥？

【原核生物的蛋白質生物合成】

氨基酸在核糖體上縮合成多肽鏈是通過核糖體循環而實現的。此循環可分為肽鏈合成的起始(intiation)，肽鏈的延伸(elongation)和肽鏈合成的終止三個主要過程。原核細胞的蛋白質合成過程以E.買粉絲li細胞為例。

【1】.肽鏈合成的起始

1.三元復合物的形成。核糖體30S小亞基附著于mRNA的起始信號部位，該結合反應是由起始因子3(IF3)介導的，另外有Mg2+的參與。故形成IF3-30S亞基-mRNA三元復合物。

2.30S前起始復合物的形成。在起始因子2(IF2)的作用下，甲酰蛋氨酸-起始型tRNA(fMet-tRNA Met)與mRNA分子中的起始密碼子(AUG或GUG)相結合，即密碼子與反密碼子相互反應。同時IF3從三元復合物脫落，形成30S前起始復合物，即IF2-30S亞基-mRNA-fMet-tRNAMef復合物。此步亦需要fGTP和Mg2+參與。

3.70S起始復合物形成。50S亞基與上述的30S前起始復合物結合，同時IF2脫落，形成70S起始復合物，即30S亞基-mRNA-50S亞基-fMer-tRNA Met復合物。此時fMet-tRNA Met占據著50S亞基的肽酰位（peptidyl site，簡稱為P位或給位），而50S的氨基酰位（aminoacyl site，簡稱為A位或受位）暫為空位。原核細胞蛋白質合成的起始過程氨基酸活化（fMet-tRNAMet形成）

【2】.肽鏈合成的延長

這一過程包括進位、肽鍵形成、脫落和移位等四個步驟。肽鏈合成的延長需兩種延長因子(Elongationfactor，簡寫為EF），分別稱為EF-T和EF

很赞哦!（38562）