01 網織紅細胞油鏡觀察(高熒光強度網織紅細胞偏高說明身體出什么狀況？)

網織狀紅細胞用煌焦油藍染色為什么顏色什么樣子？

煌焦油藍染色后，制作成薄血片進行油鏡觀察，可觀察到成熟紅細胞是呈淺蘭色（或灰藍色），整個背景色稍暗黃，有核細胞的核的顏色跟背景色相似，能看到其輪廓，同時還能在有核細胞的胞漿（胞質）中看到藍色顆粒（因為煌焦油藍染的是RNA物質，而有核細胞的胞漿中部分有RNA物質）

測定網織紅細胞有何意義?

網織紅細胞參考值：成人為0．008～0．02，或(25～75)×10^9／L；初生兒為0．02～0．06。

(1)網織紅細胞計數可以判斷骨髓紅細胞系統造血功能，如溶血性貧血和急性失血后5～10天，網織紅細胞增高。而典型再生障礙性貧血病例，則降低。

(2)可作為療效觀察指標，故網織紅細胞計數為對貧血病人經常隨訪檢查項目之一。

(3)有人認為僅用網織紅細胞百分比或絕對值表達還不夠確切，為此提出在貧血時最好計算網織紅細胞生成指數(reticulocytepro-ctionindex，RPI)。它代表網織紅細胞的生成相當于正常人的多少倍。

RPI=（網織紅細胞比例×100/2）×（病人紅細胞比積/正常人紅細胞比積）

"2"為網織紅細胞成熟時間(天)，正常人紅細胞比積，男性定為0．45，女性為0．40。如紅細胞比積正常時，網織紅細胞成熟時間應為1天。網織紅細胞比值即在油鏡下選擇紅細胞分布均勻、網織紅細胞染色較好的部分計數1000個紅細胞中的網織紅細胞數，除以1000即為網織紅細胞比值。

也可用網織紅細胞校正值(買粉絲rrectedreticulocyte買粉絲unt)報告(見下式)：

網織紅細胞校正值=網織紅細胞比值×(病人紅細胞比積/正常人紅細胞比積)

高熒光強度網織紅細胞偏高說明身體出什么狀況？

1、提示骨髓造血功能旺盛。見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血，尤以溶血性貧血時增加最為顯著，常>10%。

2、缺鐵性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后，可見網織紅細胞明顯增加。

網織紅細胞計數反應骨髓造血功能的重要指標。網織紅細胞增多表示骨髓紅系增生旺盛，常見于溶貧、急性失血、缺鐵貧、巨幼貧等，網織紅細胞減少表示骨髓造血功能減低，常見于再障、骨髓病性貧血。

不穩定血紅蛋白簡介

目錄 1 拼音 2 英文參考 3 概述 4 不穩定血紅蛋白的醫學檢查 4.1 檢查名稱 4.2 分類 4.3 化驗取材 4.4 不穩定血紅蛋白的測定原理 4.5 試劑 4.6 操作方法 4.7 正常值 4.8 化驗結果臨床意義 4.9 附注 4.10 相關疾病 1 拼音

bú wěn dìng xuè hóng dàn bái

2 英文參考

UHb

unstable hemoglobin

3 概述

不穩定血紅蛋白是血紅蛋白病的一種類型。國內已發現的不穩定血紅蛋白有十余種。目前常用于鑒別不穩定血紅蛋白的方法有三種。

4 不穩定血紅蛋白的醫學檢查 4.1 檢查名稱

不穩定血紅蛋白

4.2 分類

臨床血液檢查 > 紅細胞

4.3 化驗取材

血液

4.4 不穩定血紅蛋白的測定原理

（1）熱不穩定試驗：不穩定Hb在體外經加熱后加速變性沉淀。由加溫后血紅蛋白溶液濃度的減低可以計算出被沉淀的不穩定Hb含量。

（2）異丙醇試驗：異丙醇是一種非極性化合物，可使血紅蛋白內部非極性的氫鍵結合減弱，從而血紅蛋白的穩定性減低。正常血紅蛋白加入異丙醇孵育于37℃ 40min以后才出現沉淀，而不穩定血紅蛋白孵育5min即出現沉淀，故可用以鑒定不穩定血紅蛋白。

（3）紅細胞變性珠蛋白小體檢查：不穩定血紅蛋白與氧化還原染料煌焦油藍共同孵育后，可形成變性的珠蛋白小體（Heinz小體）貼于紅細胞膜附近，又稱為紅細胞包涵體。

4.5 試劑

（1）熱不穩定試驗：

①0.1mol/L Tris緩沖液：（配制方法見異丙醇試驗）。

②氰化高鐵血紅蛋白稀釋液，取NaHCO30.1g，KCN 5mg及高鐵氰化鉀20mg溶于100ml蒸餾水中。

（2）異丙醇試驗：

①0.1mol/L Tris緩沖液（pH7.4）：取三羥甲基氨基甲烷1.21g溶于20ml蒸餾水中。以0.1mol/LHCl校正pH達7.4（約需0.1mol/LHCl 70～80ml），加蒸餾水到100ml，密封冰箱保存。

②17%（V/V）異丙醇溶液：取異丙醇17ml于100ml容量瓶中，再加pH7.4 Tris緩沖液至刻度。加蓋密封，冰箱可存1周。

（3）紅細胞變性珠蛋白小體檢查：10g/L煌焦油藍：煌焦油藍1g，檸檬酸鈉0.4g溶解于100ml生理鹽水中，過濾，冰箱中可保存2個月。

4.6 操作方法

（1）熱不穩定試驗：

①取新鮮制備的溶血液0.5ml，加入0.1mol/LTris緩沖液2.5ml中，混勻后，取1.5ml于另1試管中。

②將兩試管均加塞，其一放于冰箱做對照，另一放于50℃水浴中，為測定管，計時。

③2h后同時取出兩管，將加熱管用自來水沖冷后，兩管同時離心。3000r/min，10min。

④取試管3支分別標明空白、對照、測定。各加入5ml氰化高鐵血紅蛋白稀釋液。然后于空白管加入Tris緩沖液0.1ml，對照，測定管分別加入離心

后的相應溶血液0.1ml，室溫放置20min。

⑤以空白調零，分別在540nm測兩管吸光。

⑥計算：

沉淀血紅蛋白%＝

（2）異丙醇試驗：

①將放于37℃水浴中預熱5min的裝有17%異丙醇溶液1ml的小試管取出，立即加入0.1ml血紅蛋白液，混勻后再放入水浴中，立即計時，于5、10、20、30、40min分別觀察沉淀產生。

②結果判斷：

（＋＋＋＋）5min出現沉淀，20min出現大塊沉淀。

（＋＋＋） 5min出現混濁。到40min出現粗顆粒。

（＋＋） 10min出現混濁，到40min出現細顆粒。

（＋） 20min出現混濁，40min出現極細顆粒。

（－） 溫育40min后仍透明或稍混濁而無顆粒。

（3）紅細胞變性珠蛋白小體檢查：

①取煌焦油藍試劑0.5ml置小試管內，加新鮮血3～4滴，混勻，加塞，置37℃溫箱中孵育。

②在10min，1h，24h各取出一滴制成薄血片，立即風干，油鏡下觀察。

③在油鏡下計數500個紅細胞，記錄出現藍色顆粒狀折光小體的紅細胞數目，求出陽性百分率。

4.7 正常值

加熱法：＜5%。

異丙醇法：陰性。

紅細胞變性球蛋白小體法：＜1%。

4.8 化驗結果臨床意義

升高（或陽性）：不穩定血紅蛋白病。

4.9 附注

（1）熱不穩定試驗：

①被檢Hb要新鮮制備。陳舊Hb可轉變為高鐵Hb。會出現假陽性。

②保溫時間要準確，溫度要恒定以免出現假陽性。

（2）異丙醇試驗：

①17%異丙醇溶液配制后放置不宜過久，否則易出現假陰性。

②血紅蛋白液須新鮮。如保存較久，出現高鐵血紅蛋白，可形成假陽性。

③試劑要預熱，嚴格控制溫度以防假陽性。

④高HbF及G6PD缺乏的標本亦可出現陽性。

（3）紅細胞變性珠蛋白小體檢查：

①本試驗亦可用靜脈抗凝血做。

②孵育時間與不穩定血紅蛋白性質有關。一般1～2h即可出現明顯的藍色球形折光小體，但也有的不穩定血紅蛋白需更長時間的孵育。才出現典型的變性珠蛋白小體。

③制片后應及時計數，存放過久，則紅細胞內變性珠蛋白小體消失。如不能及時計數，可存放于干燥器或37℃溫箱。

④煌焦油藍染色后不能用伊紅美藍染色液復染，復染后可減少計數結果。

⑤變性珠蛋白小體需與網織紅細胞鑒別。前者包涵體呈較大圓形，均勻，彌散沉淀，整個紅細胞基質消失，而且需培育10min以上才逐漸清晰。而網織紅細胞在血液與煌焦油藍混合后數分鐘內顯示出網狀沉淀，紅細胞基質完整。

4.10 相關疾病

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