02 網織紅細胞計數ret儀器法(血常規復檢規則及解釋)

檢查標本是否有凝塊，②涂片鏡檢估計PLT數，③如PLT仍聚集，按實驗室SOP進行。

31.PLT報警：(1)復檢條件：除PLT聚集外的PLT和MPV報警;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

32.IG報警：(1)復檢條件：首次結果出現陽性報警;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

33.IG報警：(1)復檢條件：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結果;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

34.左移報警：(1)復檢條件：陽性報警;(2)復檢要求：按實驗室SOP進行。

35.不典型和(或)變異Lym：(1)復檢條件：首次結果出現陽性報警;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

36.不典型和(或)變異Lym：(1)復檢條件：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結果;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

37.原始細胞報警：(1)復檢條件：首次結果出現陽性報警;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

38.原始細胞報警：(1)復檢條件：3-7天內WBC的Detal值通過，有以前確認的陽性報警結果;(2)復檢要求：按實驗室SOP進行。

39.原始細胞報警：(1)復檢條件：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結果;(2)復檢要求：涂片鏡檢。

40.NRBC報警：(1)復檢條件：陽性報警;(2)復檢要求：①涂片鏡檢，②如發現NRBC，計數NRBC，重新計算WBC結果。

41.Ret：(1)復檢條件：散點/直方圖異常;(2)復檢要求：①檢查儀器狀態是否正常，②如吸樣有問題，重測標本，③如結果維持不變，涂片鏡檢。

二、國際血液學復檢專家組推薦的41條自動CBC和DC復檢規則專業術語釋義

1.涂片鏡檢(slidereview)：指將血涂片進行瑞氏染色后，用顯微鏡檢觀察各種血細胞形態，尤其是CBC自動計數的報警陽性細胞，但無需分類計數。

2.人工分類(manualdifferentail)：指將血涂片進行瑞氏染色后，用顯微鏡進行人工分類100或200個有核細胞，并計算各類有核細胞所占百分率。

3.Detalcheck定義：指同一患者連續兩次檢測結果間的差異，用以判斷因標本等錯誤引起結果的偶然誤差。

4.Detal限：可由實驗室自行根據患者生物學變異、標本采集時間和自動分析儀的分析特征制定。(各大醫院暫設Detal限30%)

5.Detal值通過和超限：前者指最近自動分析儀所得結果與前次結果的差異小于所規定的限定值;后者則指二次結果的差異超過所規定的限定值。

6.陽性和陰性detal：其分別指最近自動分析儀所得結果與前次結果的差異超過所規定的限定值的高限和低限。

7.Detal值超限后所采取的措施：國際血液學復檢專家組尚未制定自動CBC與DC的Detal限，但當其超過所制定的Detal值，應采取建議的措施。

8.IG/Band報警提示除外：指如遇IG/Band，參見復檢規則第32-34條。

9.如需要，進行人工分類：指根據實驗室和臨床需求判斷是否進行人工分類。

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五分類血球儀白細胞做不出來是什么原因

血細胞分析儀的工作原理及其近期發展姜穗(溫州醫學院附屬第二醫院臨床工程科浙江省 溫州市325027) ［摘要］本文簡要介紹了血細胞分析儀的主要工作原理，各主要廠家在血細胞分析儀上采用的白細胞分類技術及業界的技術進展

［關鍵詞］血細胞分析儀，紅細胞，血小板，白細胞，計數The Work Principle Of Hematology AnalyzerAnd Its Near Period The DevelopmentJiang Sui(Clinical Engineering Department of The Se買粉絲nd Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou Zhejiang ,China)Abstract:Tise paper introces the major principle of hematology analyzer,the categorized technology of white blood cell mainly used by manufacturer and the development of analyzing technology

Keyword: hematology analyzer,red blood cell,platelet,white blood cell,買粉絲unter 自50年代初庫爾特先生發明了粒子計數技術的專利，制造了第一臺血細胞分析儀并應用于臨床以來，血細胞分析儀的發展已有50年的歷史

血細胞分析儀實質上是指對一定體積內血細胞數量及異質性進行分析的儀器

最初的血細胞計數儀（Cell Counter）僅能計數紅細胞（RED）和白細胞(WBC)，后來又有了血紅蛋白（HBG）、血小板(PLT)、紅細胞壓積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）等幾個參數

而發展成為血細胞分析儀（Hematology Analyzer）后，又增加了許多分析和計算參數，如紅細胞體積分布寬度（RDW）、平均血小板體積（MPV）、血小板體積分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)、大血小板比率、白細胞三分群、白細胞五分類、血紅蛋白濃度分布寬度、異常淋巴細胞提示、幼稚細胞提示等各種參數和功能也不斷地添加到一些品牌的儀器上

電阻檢測法的基本原理是：在待測液體中置一微孔，在微孔的兩端各加一定電壓的電極，當液體中的顆粒巾進經過微孔時，電極間的電阻就會產生訓瞬間的變化，以因而產生電脈沖，對這種電脈沖進行計數就可得到顆粒的數量，脈沖幅度的大小表示顆粒的體積的大小，經過對各種細胞所產生脈沖的大小的電子的選者擇，可以區分出不同種類的細胞；在液體中加上一定的負壓就能使經過微孔的液體流動

隨著電子技術、流式細胞技術、激光技術、電子計算機技術和新熒光化學物質等多種高科技技術在臨床檢驗工作的應用，使血細胞分析儀在自動化程度、先進功能和完美設計方面提高到了一個嶄新的階段，血細胞分析儀已經不僅僅局限在進行常規的血細胞分析，還增加了許多擴展功能，例如將網織紅細胞（RET）的計數和分析功能加入其中，一些儀器還另外增加了幼稚細胞分析和有核紅細胞分析功能，甚至對血液細胞中某些寄生蟲進行提示，更有一些儀器把流式細胞分析儀的某些功能和并到血細胞分析儀上，在進行常規血細胞分析時可得到某些淋巴細胞亞群的分析結果

在常規血細胞計數儀上，紅細胞（RBC）、血小板（PLT）共用一個測量通道，血紅蛋白含量（HGB）的測定在任何類型、檔次的儀器中其測試原理都是相同的

白細胞的計數和分類有其專用的通道，現我們就對分析儀上各測試項目所使用的技術方法和原理作些簡要介紹

一、血紅蛋白含量測定血紅蛋白含量的測定是在被稀釋的血液中加入溶血劑后，使紅細胞釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑結合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統，在特定波長（一般在530-550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比例，儀器便可顯示Hb濃度

不同系列的血液分析儀配套溶血劑配方不同，形成的血紅蛋白衍生物也不同，但大多數的最大吸收光譜接近540nm

近年來許多高檔的分析儀上采用了激光散射法進行單個血紅細胞血紅蛋白的分析，以盡量減少高WBC、乳糜血、高膽紅素等對HBG比色的影響

二、血紅細胞及血小板的檢測血紅細胞的檢測是血液分析儀的重要組成部分，紅細胞的檢測以往主要還是使用阻抗法對紅細胞的數目和體積計數，以此分選出不同大小的信號并打印出紅細胞體積分布直方圖

但現在也采用光學和電阻抗法結合的處理方法對紅細胞體積進行三維空間分析（3D）以期得到更正確的結果

如拜爾的ADVIA 120以光散射法檢測紅細胞，以低角度前向光散射和高角度散射兩個測量系統同時測量1個紅細胞，根據低角度光轉換能量的大小測量單個紅細胞體積與總數；根據高角度的光散射得出單個血紅蛋白濃度，可準確得出MCV（平均紅細胞體積）、MCH（平均血紅蛋白含量）、MCHC（平均血紅蛋白濃度）測定值，并繪出紅細胞散射圖，單個紅細胞體積及紅細胞內Hb含量的直方圖及求出RWD（紅細胞體積分布寬度）、HDW（紅細胞血紅蛋白分布寬度）等參數

由于血小板和紅細胞體積的明顯差異，很容易用一個限定閾值將兩者同時測得的光電信號區分

因此，迄今為止全血分析中血小板、紅細胞檢查均采用一個共用的分析系統

但由于血小板和紅細胞測量信號常有交叉，如大血小板的脈沖信號可能被誤認為紅細胞而計數、小紅細胞的脈沖信號可能進入血小板通道，造成實驗誤差

各血細胞分析儀生產廠家采用多種先進技術以減少血小板計數的干擾，以下我們就分別給予介紹：1、掃流技術（sweep flow）：由于血小板和紅細胞在同一個計數池中計數，紅細胞體積較大，在通過正中計數感應區時會形成一個大脈沖，若有回流會同時又產生一個因渦流再度進入感應區邊緣而形成的小脈沖使電極可能感應到相當于血小板大小的小脈沖，使血小板計數假性增多

掃流技術是在進行紅細胞和血小板計數的同時，在紅細胞計數小孔的后面有一個穩定的液流通過，這樣可以使后的紅細胞被立即沖走，以防止回到感應區被計數為血小板

2、防反流裝置：為防止以被計數的紅細胞又回到感應區，在紅細胞計數池小孔的內側按裝一塊帶孔的小板，板上小孔的直徑比紅細胞計數孔略大，正好位于計數孔的后方、感應區以外

當進行細胞計數時，由于負壓的作用細胞快速通過小孔感應區并穿過擋板小孔，即使擋板外側產生渦流，紅細胞也會被阻擋在感應區之外，不影響血小板計數

3、鞘流技術（sheath flow）：為了避免計數中血細胞從小孔邊緣處流過及湍流、渦流的影響，發明了鞘流技術

具體做法是用一毛細管對準小孔管，細胞混懸液從毛細管噴出，同時與四周流出的鞘液一起流過敏感區，保證細胞混懸液在中間形成單個排列的細胞流，四周被鞘液圍繞

鞘流技術可應用于兩種細胞計數原理：一為電阻抗原理，鞘流通過小孔的敏感區進行細胞計數；另一種為激光計數原理，細胞液流室較長，與激光垂直相交，激光光束對流經的每一個細胞照射后產生光散射，利用此原理進行細胞計數

4、浮動界標：正常標本中紅細胞與血小板體積相差較大，一般將紅細胞與血小板的界限定于35fl，大的為紅細胞，小的為血小板，也有以30fl或20fl為界限的

但在某些病理情況下可能有大血小板超過35fl界限，造成血小板漏計使結果偏低；反之，如果紅細胞體積偏小（如缺鐵性貧血、地中海性貧血），則可能將部分小紅細胞誤計為血小板，使血小板計數偏高

為了結果準確一些，計數儀利用計算機在5-35fl間尋找直方圖最低點，以此定為紅細胞和血小板的界限

由此可使所計數的數值符合實際情況

因為各種細胞間的界

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