03 網織紅細胞比值計算公式(兒童鉛中毒案例及解析_兒童鉛中毒多不多)

HLA與排斥反應 10 HLA與法醫 11 HLA分型技術 11.1 血清學分型技術 11.1.1 HLAⅠ類抗原的檢測 11.1.2 HLADR、DQ抗原檢測 11.2 細胞學分型技術 11.3 HLA的DNA分型技術 11.3.1 限制性片段長度多態性檢測技術 11.3.2 PCR/SSO技術 11.3.3 PCR/SSP技術 1 拼音

rén bái xì bāo kàng yuán xì tǒng

2 英文參考

human leu買粉絲cyte antigen,HLA

排斥反應本質上是一種免疫反應，它是由組織表面的同種異型抗原誘導的。這種代表個體特異性的同種抗原稱為組織兼容性抗原（histopatibility antigen）或移植抗原（transplantation antigen）。機體內與排斥反應有關的抗原系統多達20種以上，其中能引起強而迅速排斥反應者稱為主要組織兼容性抗原，其編碼基因是一組緊密連鎖的基因群，稱為主要組織兼容性復合體（major histopatibilityplex,MHC）。控制機體免疫應答能力與調節功能的基因（immune uesponse gene,Ir gene ）也存在于MHC內。因此，MHC不僅與移植排斥反應有關，也廣泛參與免疫應答的誘導與調節。人類的MHC稱為人白細胞抗原系統（human leu買粉絲cyte antigen,HLA）。

3 人類HLA基因復合體

對人主要組織兼容性抗原系統及其基因復合體的認識比小鼠約晚10年，法國學者Dausset在1958年首先發現，腎移植后出現排斥反應的患者以及多次輸血的患者血清中含有能與供者白細胞發生反應的抗體。后者所針對的抗原即人類主要組織相溶性抗原。由于該抗原首先在白細胞表面被發現且含量最高，而且白細胞抗原(human leu買粉絲cyte antigen,HAL)；人類MHC，即編碼HLA的基因群自然數為HAL復合體。

3.1 HLA復合體定位及結構

HLA復合 *** 于人第6號染色體的短臂上。該區DNA片段長度約3.5～4.0×千個堿基對，占人體整個基因組的1/3000。圖52顯示HLA復合體結構。HLA復合體共有數十個座，傳統上按其產物的結構、表達方式、組織分布與功能可將這些基因座分為三類。

圖52 人類HLA復合體結構示意圖

1．HLAⅠ類基因在Ⅰ基因區內存在多達31個有關的Ⅰ類基因座,其中HLAA、HLAB和HLAC為經典的HLAⅠ類基因,其它基因的產物分布有限,且其功能不明,另外還有許多偽基因.

2.HLAⅡ類基因 HLAⅡ類基因區包括近30個基因座,其中經典的Ⅱ類基因一般指DR、DP和DQ，它們編碼的產物均為雙肽鏈（α、β）分子。近年來，陸續發現了一些位于Ⅱ類基因區的新基因座，其中某些基因的產物與內源性抗原的處理與呈遞有關。

3．HLAⅢ類基因 HLAⅢ類基因區域至少已發現36個基因座，其中C2、C4、Bf座編碼相應的補體成分，另外還有21羧化酶基因（CYP21A、B）腫瘤壞死因子基因（TNFA、B）以及熱休克蛋白70（heat shock protein70,HSP70）基因。補體C4由二個不同的基因（C4A與C4B）編碼。HLAⅢ類基因區結構見圖53。

圖53 HLAⅢ基因區結構示意圖

3.2 HLA等位基因及編碼產物的命名

按WHOHLA命名委員會發布的資料，僅經典的HLAⅠ、Ⅱ類座（A、B、C、DR、DQ、DP）等位基因即達279個。表51列出了至1991年11月已識別的HLA特異性。根據該委員會制定的命名原則，凡確定新的HLA抗原特異性都要明確其DNA序列。此外，下列幾種情況在HLA特異性編號后加W（workshop）標記。

表51 已識別的HLA特異性（1991）

A B C D DR DQ DF A1 B5 B51（5） Cw1 Dw1 DR1 DQ1 DPw1 A2 B7 B5102 Cw2 Dw2 DR103 DQ2 DPw2 A210（2） B703B5103（7） Cw3 Dw3 DR2 DQ3 DPw3 A3 B8B52（5） Cw4 Dw4 DR3 DQ4 DPw4 A9 B12 B53 Cw5 Dw5 DR4 DQ5(1) DPw6 A10 B13 B54（22） Cw6 Dw6 DR5 DQ6(1) A11 B14 B55（22） Cw7 Dw7 DR6 DQ7 A19 B15 B54（22） Cw8 Dw8 DR7 DQ18(3) A23（9） B16 B57（17） Cw9(w3) Dw10 DR8 DQ19(3) A24（9） B17 B54（17） Cw1(w3) Dw11(w7) DR9 A2403（9） B18 B59 Dw12 DR10 A25（10） B21 B60（40） Dw13 DR11(5) A26（10） B22 B61（40） Dw14 DR12(5) A28 B27 B62（15） Dw15 DR13(5) A29（19） B35 B63（15） Dw16 DR13(6) A30（19） B37B64k（14） Dw17(w7) DR14(6) A31（19） B38（16 B65（14） Dw18(w6) DR1403 A32（19） B39（16） B67 Dw19(w6) DR1404 A33（19） B40B70 Dw20 DR15(2) A34（10） B4005(21) B71(70) Dw21 DR16(2) A36 B41B72(70) Dw22 DR17(3) A43 B42B73 Dw23 DR18(3) A66（10） B44(12)B75(15) DR51 A68（28） B45(12)B76(15) Dw24 A69（28） B46B77(15) Dw25 DR52 A74（19） B47 B7801 B26 DR53 B48 B49（21） Bw4 B50（21）Bw6

①Bw4和Bw6作為表位以其它B座等位基因個區別；②C座的特異性加w,以與補體相區分；③由經典細胞學分型方法鑒定D和DP特異性加W。

3.3 HLA復合機遺傳特征

HLA復合體具備某些有別于其它真核基因系統的特征。

1．單體型遺傳方式 HLA復合體是一組緊密連鎖的基因群。這些連鎖在一條染色體上的等位基因很少發生同源染色體間的交換，構成一個單體型（haplo）。在遺傳過程中，HLA單體型作為一個完整的遺傳單位由親代傳給子代。有必要區分HLA表型、基因型與單體型這三個概念。某一個體HLA抗原特異性型別稱為表型（pheno）；HLA基因在體細胞兩條染色體上的組合稱為基因型（geno）；HLA基因在同一條染色體上的組合稱為單體型（haplo）（表52）。

受檢者 甲

A1 A2

B8 B12 乙

A1 A1

B8 B12 丙

A1 A1

B8 B8 表型 HLAA1、2：B8、12 HLAA1：B8、12 HLAA1、B8 基因型 HLAA1、A2

HLAB8、B12 HLAA1、A1

HLAB8、B12 HLAA1、A1

HLAB8、B8 單體型 HLAA1、B8/A2、B12 HLAA1、B8/A1、B12 HLAA1、B8/A1、B8

二倍體（diploid）生物的每一細胞均有兩個同源染色體組，分別來自父母雙方。故子女的HLA單體型也是一個來自父方，一個來自母方。在同胞之間比較HLA單體型型別只會出現下列三種可能性：二個單體型完全相同或完全不同的機率各占25%；有一個單體型相同的機率占50%。至于親代與子代之間則必然有一個單體型相同，也只能有一個單體型相同（圖540。這一遺傳特點在器官移植供者的選擇以及法醫的親子鑒定中得到了應用。

圖5－4HLA 單體型遺傳示意圖

注：a、b、c、d代表單體型

A1、B8、A2、B35等代表HLA基因座等位基因

2．多態性現象 多態性（polymorphi *** ）是指在一隨機婚配的群體中，染色體同一基因座有兩種以上基因型，即可能編碼二種以上的產物。HLA復合體是迄今已知人體最復雜的基因復合體，有高度的多態性。HLA的多態性現象乃由于下列原因所致：①復等位基因（multiple alleles）：位于一對同源染色體上對應位置的一對基因稱為等位基因（allele）；由于群體中的突變，同一座的基因系列稱為復等位基因。前已述及，HLA復合體的每一座均存在為數眾多的復等位基因，這是HLA高度多態性的最主要原因。由于各個座位基因是隨機組合的，故人群中的基因型可達108之多。②共顯性(買粉絲dominance)；一對等位基因同為顯性稱為共顯性。HLA復合體中每一個等位基因均為共顯性，從而大大增加了人群中HLA表型的多樣性，達到107數量級。因此，除了同卵雙生外，無關個體間HLA型別全相同的可能性極小。

HLA的高度多態性顯示了遺傳背景的多樣性，這可能是高等動物抵御不利環境因素的一種適應性表現，從而維持種屬的生存與延續具有重要的生物意義，但也對組織移植過程中尋找配型合的供體帶來很大的困難。

4 HLA抗原的分子結構

1987年Bjorkman等首先借助X線晶體衍射技術弄清了HLAA2分子的立體結構。其后，其它HLAⅠ、Ⅱ類分子結構的研究也取得了進展，從而對這些分子的生物學功能提供了較確切的解釋。

（一）HLAⅠ類分子

所有的HLAⅠ類分子均含有二條分離的多肽鏈，一條是由MHC基因編碼的α鏈或稱重鏈（44kD）。根據對HLAA2和Aw68分子的晶體結構分析，Ⅰ類分子可分為四個區：（圖55）：①氨基端胞外多肽結合區：該區由二個相似的各包括90個氨基酸殘基的片段組成，分別稱為α1和α2。該功能區含有與抗原結合的部位。后者呈深槽狀，其大小與形狀適合于已處理的抗原片段，約容納8～10個氨基酸殘基。Ⅰ類分子的多態性殘基也位于該區域。②胞外lg樣區：該區又稱為重鏈的α3片段，包括90個氨基酸殘基，與免疫球蛋白的恒定區具有同源性。Ⅰ類分子與TC細胞表面CD8分子的結合部位即在α3片段。Ⅰ類分子的β鏈又稱β2微球蛋白，也結合于該區。β鏈由第15號染色體的基因編碼，它不插入細胞膜而游離于細胞外。β2微球蛋白與α1、α2、α3片段的相互作用對維持Ⅰ類分子于然構型的穩定性及其分子表達有重要意義。③跨膜區：該區氨基酸殘基形成螺旋狀穿過漿膜的脂質雙層，將類分子錨定在膜上。④胞漿區：該區位于胞漿中

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