04 流式細胞儀檢測網織紅細胞的參數(流式細胞術的應用范圍)

制備過程中出現人為非特異性熒光干擾(尤其在間接免疫熒光染色中)或細胞濃度低等影響檢測結果。解決這些影響因素的方法如下：

(1) 確保標本上機檢測前的濃度為1X106/ml，細胞濃度過低直接影響檢測結果。

(2) 使用蛋白封閉劑，封閉非特異結合位點，尤其在間接免疫熒光標記時必不可少。常用的蛋白封閉劑為0.5%牛血清白蛋白和1%胎牛血清。

(3) 熒光抗體染色后充分洗滌，注意混勻和離心速度，減少重疊細胞和細胞碎片。

(4) 設置對照樣品，采用與抗體來源同型匹配的無關對照和熒光抗體的本底對照。

(5)判定結果時，應注意減去本底熒光，為使免疫熒光的定量分析更精確，應用計算機程序軟件，用擬合曲線方法從實驗組的曲線峰值中減去對照組的曲線峰值，可以得到更準確的免疫熒光定量結果。

(6) 注意染色后避光，保證細胞免疫熒光的穩定。

9.2 DNA倍體分析的質量控制

DNA倍體分析的質量控制仍沒有統一的標準， 各文獻報道的實驗結果差異較大，1993年10月美國癌癥研究組織制定了FCMDNA定的統一標準，我們根據這些標準并結合國內有經驗的專家多年的實踐，對FCM的DNA分析技術的質控和注意事項進行說明。

(1) 手術切除的新鮮標本或活檢針吸標本取材時，要避免出血壞死組織。

(2) 標本采集后要及時固定或深低溫保存，以免組織發生自溶，DNA降解，而造成測試結果的誤差。

(3) 固定劑要采用對組織細胞穿透性強的濃度，70%的乙醇固定效果較好。

(4) 單細胞懸液制備過程中，注意將待測細胞成分分離出來，減少其他成分的干擾，并注意不要損傷該群細胞。

(5) 細胞樣品的采集要保證足夠的細胞濃度，即1X106/ml，雜質、碎片、團塊和重疊細胞應<2%，對腫瘤細胞DNA異倍體的分析樣品，至少有20%的腫瘤細胞存在。

(6) 石蠟包埋組織單細胞制備時要注意：取材時應選取無自溶、壞死的組織，對腫瘤組織標本，選取含腫瘤細胞豐富的區域；石蠟組織片的厚度要適宜，最好為40～50μm 。過薄或過厚的切片均會影響檢測結果；徹底脫蠟，以免殘留的石蠟影響酶的消化活性，驗證脫蠟是否完全的方法是棄去二甲苯，加入100%乙醇，如果無絮狀物浮起，說明蠟已脫凈；水化要充分，使組織還原到與新鮮組織相似的狀態；注意消化的時間和消化酶的活性。常規使用0.5%胃蛋白酶，pH 1.5。

9.3 操作

(1)流式細胞儀在整個工作過程中處于最佳狀態，能保證定量檢測的準確性和檢測精度。使用標準樣品調整儀器的變異系數在最小范圍，分辨率在最好狀態，能避免在測量過程中儀器條件的變化引起的檢測誤差。

(2)評價儀器精度的重要指標是儀器的變異系數（CV），對于校準樣品，其CV值越小越好，CV值越小，說明儀器校正的精度越高。校準樣品包括非生物樣品（熒光微球）和生物細胞樣品（人淋巴細胞、雞紅細胞等）。目前，非生物熒光微球已有商品試劑，CV一般<2%～3%。

9.4 資料分析

(1) 當樣品中碎片雜質或團塊過多，所測細胞數在20%以下，組方圖的基線抬高時，應放棄分析處理。

(2) 做細胞周期分析時，樣品細胞數應在1萬個，排除碎片、雜質和團塊，當異倍體細胞數占總細胞數10%以下時，需要結合其他診斷指標，不可盲目下結論，至少異倍體細胞占總細胞數的20%以上，可以確定異倍體的存在。

(3)DNA分析時，正常二倍體細胞組方圖CV值>8%時放棄分析，但腫瘤細胞的CV值>8%，與腫瘤細胞的異質性有關。另外，DNA倍體分析時，同源組織的不同個體會出現10%的漂移。

每個醫院做血常規檢查都是一樣的嗎，有沒有技術差距的，

不同醫院的檢查結果，有可能存在明顯的差別嗎？答案是肯定的！

我出門診或者急診的時候，經常有患者來就診，同時也會帶來其他醫院的檢查和化驗結果，特別是外地趕來的患者，有時候會帶過來很多的檢測結果。患者常常會問，我在當地做了很多檢查，還需要重新檢查嗎？結果會不會有差別？我先來舉一個例子：

我曾經碰到這樣一個患者，在當地醫院體檢，做甲狀腺檢查，發現甲狀腺有一個結節，1厘米大小，彩超報告為4級腫物，考慮是癌癥，醫生強烈建議他直接做手術切掉。患者的兒子在北京工作，想著來北京做手術，就帶著彩超結果來了。

不同醫院的檢查結果，會存在差別嗎？醫生告訴你真相

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我給患者檢查了一下甲狀腺，又仔細看了一下超聲檢查的圖片和描述，感覺不像是癌癥，建議她在我們醫院重新復查一個彩超。我們醫院的檢查結果出來了，考慮是良性的甲狀腺結節。我告訴患者，你這種情況，癌癥的可能性很小，我建議你定期觀察，不用穿刺活檢，更不需要手術治療。

可能是我給他看病的時候很認真，詳細地解釋了病情，這位患者很相信我，沒有選擇手術治療，也沒有穿刺活檢。已經三年多過去了，她的甲狀腺結節沒有增大，沒有惡變的跡象，什么問題都沒有。

如果患者聽從當地醫院的建議，草率地做了手術切除，有可能出現手術并發癥。而且，白挨一刀，脖子上還有留下一道長長的疤痕。

所以，不同醫院的檢查結果是有可能存在差別的，甚至是天壤之別。

我來具體談一談，哪些檢查可能存在差別，僅供參考：

（1）抽血化驗結果

一般來說，小醫院和大醫院，化驗結果沒有什么差異，因為現在都是使用機器檢測，查的血常規、血型、肝腎功能、血糖、血脂、腫瘤標志物、尿常規、大便常規等化驗，二甲醫院和三甲醫院，不會有太大的差距，無論是哪個醫院，化驗結果應該都是很一致的。但是，病情是不斷變化的，這些化驗指標會發生改變，來了新的醫院之后，可能需要復查血常規、生化電解質等指標，了解病情的變化。

不同醫院的檢查結果，會存在差別嗎？醫生告訴你真相

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所以，抽血化驗、尿常規、大便常規等化驗檢查，不同醫院差別不大。

（2）彩超檢查

超聲檢查是超聲科醫生用來診斷疾病的手段，由于是超聲科醫生來檢查病人，診斷準確性與超聲科醫生的水平有很大的關系，不同醫院的超聲科醫生，甚至一個醫院的超聲科醫生，診斷水平差距有可能是比較大的。所以，超聲檢查診斷的誤差相對來說是比較大的，誤診率也會高一些。

如果彩超檢查的結果，與患者的病情不符合，還是建議再做其他檢查，或者去其他醫院復查一下。

（3）CT或者核磁共振等影像學檢查

影像學檢查也是機器掃描，不同醫院的機器，有可能存在一些差別，分辨率會有一些差距，大家肯定都聽說過多少排的CT，例如16排、64排、128排CT。排數其實指的就是CT探測器在Z軸方向的物理排列數目，即有多少排探測器。

不同醫院的檢查結果，會存在差別嗎？醫生告訴你真相

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排數越高，掃描的時間越快，層與層之間越薄，分辨率越高，可以發現一些微小的病變，不容易漏診，還可以更清晰地顯示血管。所以，不同醫院的機器不一樣，有可能得出的結果會不一樣。

還有一點，檢查報告是由影像科醫生出，不同的影像科醫生，讀片水平是存在一些差距的，這樣也有可能造成誤差。去其他醫院看病的時候，需要把影像學片子和報道都帶過去。如果醫生覺得影像學的片子質量很高，就不需要再做。如果醫生覺得外院的報告有問題，可以請醫院的影像科醫生會診檢查片子，重新出一個報告。

（4）病理學檢查結果

病理學檢查是病理科醫生取材，染色，制片，在顯微鏡下觀察有沒有病變，是何種病變，例如是炎癥，還是腫瘤，是哪一種腫瘤，腫瘤侵犯的深度等等。病理診斷是最終診斷，是診斷大多數疾病的金標準，有了病理診斷就可以確診。所以，病理診斷一定要非常慎重，如果診斷錯誤，有可能造成嚴重的后果。

不同醫院的檢查結果，會存在差別嗎？醫生告訴你真相

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常規的，很常見的疾病，大部分醫院應該不會有明顯的差別。但是，對于一些比較復雜的病情，比較少見的病變，或者取材比較少，病理診斷可能會有困難，還是建議去大醫院會診一下。病理切片都可以外借，可以拿去其他醫院會診。

在不久的將來，所有的診斷可能會集中起來，醫院會取消相關科室

在不久的將來，不同醫院的檢驗科、影像科和病理科等輔助檢查的科室，可能會統一起來，國家會建立一些專門的檢查中心。每個醫院都會取消影像科、病理科和檢驗科，在同一個地區的所有醫院，輔助檢查都會送到附近的檢查中心去查。這樣可以避免不同醫院的檢查存在差別，可以避免重復檢查和化驗。這樣既可以減少誤診率和漏診率，還可以為患者節約費用。

不同醫院的檢查結果，會存在差別嗎？醫生告訴你真相

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人工智能在輔助檢查方面，也取得了非常快速的進步，以后閱片的可能不是醫生，而是機器人，機器人可以盡可能的避免人為誤差，提高診斷的準確率和客觀性。

總而言之，只要是有人參與，由醫生來操作或者出報告的檢查，都可能存在誤差，可能存在水平層次不齊，但是，大部分情況下，診斷是一致的。

五分類血球儀白細胞做不出來是什么原因

血細胞分析儀的工作原理及其近期發展姜穗(溫州醫學院附屬第二醫院臨床工程科浙江省 溫州市325027) ［摘要］本文簡要介紹了血細胞分析儀的主要工作原理，各主要廠家在血細胞分析儀上采用的白細胞分類技術及業界的技術進展

［關鍵詞］血細胞分析儀，紅細胞，血小板，白細胞，計數The Work Principle Of Hematology AnalyzerAnd Its Near Period The DevelopmentJiang Sui(Clinical Engineering Department of The Se買粉絲nd Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou Zhejiang ,China)Abstract:Tise paper introces the major principle of hematology analyzer,the categorized technology of white blood cell mainly used by manufacturer and the development of analyzing technology

Keyword: hematology analyzer,red blood cell,platelet,white blood cell,買粉絲unter 自50年代初庫爾特先生發明了粒子計數技術的專利，制造了第一臺血細胞分析儀并應用于臨床以來，血細胞分析儀的發展已有50年的歷史

血細胞分析儀實質上是指對一定體積內血細胞數量及異質性進行分析的儀器

最初的血細胞計數儀（Cell Counter）僅能計數紅細胞（RED）和白細胞(WBC)，后來又有了血紅蛋白（HBG）、血小板(PLT)、紅細胞壓積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）等幾個參數

而發展成為血細胞分析儀（Hematology Analyzer）后，又增加了許多分析和計算參數，如紅細胞體積分布寬度（RD

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