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01 煌焦油藍染色顯示的網織紅細胞內藍色的(不穩定血紅蛋白簡介)
Instagram刷粉絲, Ins買粉絲自助下單平台, Ins買贊網站可微信支付寶付款2024-06-19 08:05:39【】1人已围观
简介什么是紅細胞形態?紅細胞形態檢查是通過血涂片染色后對血片中的紅細胞的形態進行觀察,對臨床診斷有重要價值,常見的紅細胞異常主要表現在紅細胞的大小、形態、染色性及包涵體等幾個方面。正常情況下,瑞氏染色血涂
什么是紅細胞形態?
紅細胞形態檢查是通過血涂片染色后對血片中的紅細胞的形態進行觀察,對臨床診斷有重要價值,常見的紅細胞異常主要表現在紅細胞的大小、形態、染色性及包涵體等幾個方面。
正常情況下,瑞氏染色血涂片顯示成熟紅細胞形態呈雙凹盤形,少數呈橢圓形。細胞大小相似,直徑6~9μm ,平均為7.5μm;淡粉紅色,中央1/3為生理性淡染區;胞質內無異常結構。
各種病因作用于紅細胞生理過程的不同階段,可引起紅細胞相應的病理變化,致使紅細胞產生特殊的形態學改變,包括紅細胞的大小、形態、染色和內涵物的異常:
(1)大小異常就是我們所說的紅細胞體積增大或縮小。
(2)形態異常,例如為球形紅細胞,橢圓形紅細胞,鐮形紅細胞等。
(3)染色反應的異常,有低色素性紅細胞,高色素性紅細胞等。
(4)結構異常有嗜堿性點彩紅細胞,有卡鉑環的紅細胞等。
不穩定血紅蛋白簡介
目錄 1 拼音 2 英文參考 3 概述 4 不穩定血紅蛋白的醫學檢查 4.1 檢查名稱 4.2 分類 4.3 化驗取材 4.4 不穩定血紅蛋白的測定原理 4.5 試劑 4.6 操作方法 4.7 正常值 4.8 化驗結果臨床意義 4.9 附注 4.10 相關疾病 1 拼音
bú wěn dìng xuè hóng dàn bái
2 英文參考UHb
unstable hemoglobin
3 概述不穩定血紅蛋白是血紅蛋白病的一種類型。國內已發現的不穩定血紅蛋白有十余種。目前常用于鑒別不穩定血紅蛋白的方法有三種。
4 不穩定血紅蛋白的醫學檢查 4.1 檢查名稱不穩定血紅蛋白
4.2 分類
臨床血液檢查 > 紅細胞
4.3 化驗取材血液
4.4 不穩定血紅蛋白的測定原理(1)熱不穩定試驗:不穩定Hb在體外經加熱后加速變性沉淀。由加溫后血紅蛋白溶液濃度的減低可以計算出被沉淀的不穩定Hb含量。
(2)異丙醇試驗:異丙醇是一種非極性化合物,可使血紅蛋白內部非極性的氫鍵結合減弱,從而血紅蛋白的穩定性減低。正常血紅蛋白加入異丙醇孵育于37℃ 40min以后才出現沉淀,而不穩定血紅蛋白孵育5min即出現沉淀,故可用以鑒定不穩定血紅蛋白。
(3)紅細胞變性珠蛋白小體檢查:不穩定血紅蛋白與氧化還原染料煌焦油藍共同孵育后,可形成變性的珠蛋白小體(Heinz小體)貼于紅細胞膜附近,又稱為紅細胞包涵體。
4.5 試劑(1)熱不穩定試驗:
①0.1mol/L Tris緩沖液:(配制方法見異丙醇試驗)。
②氰化高鐵血紅蛋白稀釋液,取NaHCO30.1g,KCN 5mg及高鐵氰化鉀20mg溶于100ml蒸餾水中。
(2)異丙醇試驗:
①0.1mol/L Tris緩沖液(pH7.4):取三羥甲基氨基甲烷1.21g溶于20ml蒸餾水中。以0.1mol/LHCl校正pH達7.4(約需0.1mol/LHCl 70~80ml),加蒸餾水到100ml,密封冰箱保存。
②17%(V/V)異丙醇溶液:取異丙醇17ml于100ml容量瓶中,再加pH7.4 Tris緩沖液至刻度。加蓋密封,冰箱可存1周。
(3)紅細胞變性珠蛋白小體檢查:10g/L煌焦油藍:煌焦油藍1g,檸檬酸鈉0.4g溶解于100ml生理鹽水中,過濾,冰箱中可保存2個月。
4.6 操作方法(1)熱不穩定試驗:
①取新鮮制備的溶血液0.5ml,加入0.1mol/LTris緩沖液2.5ml中,混勻后,取1.5ml于另1試管中。
②將兩試管均加塞,其一放于冰箱做對照,另一放于50℃水浴中,為測定管,計時。
③2h后同時取出兩管,將加熱管用自來水沖冷后,兩管同時離心。3000r/min,10min。
④取試管3支分別標明空白、對照、測定。各加入5ml氰化高鐵血紅蛋白稀釋液。然后于空白管加入Tris緩沖液0.1ml,對照,測定管分別加入離心
后的相應溶血液0.1ml,室溫放置20min。
⑤以空白調零,分別在540nm測兩管吸光。
⑥計算:
沉淀血紅蛋白%=
(2)異丙醇試驗:
①將放于37℃水浴中預熱5min的裝有17%異丙醇溶液1ml的小試管取出,立即加入0.1ml血紅蛋白液,混勻后再放入水浴中,立即計時,于5、10、20、30、40min分別觀察沉淀產生。
②結果判斷:
(++++)5min出現沉淀,20min出現大塊沉淀。
(+++) 5min出現混濁。到40min出現粗顆粒。
(++) 10min出現混濁,到40min出現細顆粒。
(+) 20min出現混濁,40min出現極細顆粒。
(-) 溫育40min后仍透明或稍混濁而無顆粒。
(3)紅細胞變性珠蛋白小體檢查:
①取煌焦油藍試劑0.5ml置小試管內,加新鮮血3~4滴,混勻,加塞,置37℃溫箱中孵育。
②在10min,1h,24h各取出一滴制成薄血片,立即風干,油鏡下觀察。
③在油鏡下計數500個紅細胞,記錄出現藍色顆粒狀折光小體的紅細胞數目,求出陽性百分率。
4.7 正常值加熱法:<5%。
異丙醇法:陰性。
紅細胞變性球蛋白小體法:<1%。
4.8 化驗結果臨床意義升高(或陽性):不穩定血紅蛋白病。
4.9 附注(1)熱不穩定試驗:
①被檢Hb要新鮮制備。陳舊Hb可轉變為高鐵Hb。會出現假陽性。
②保溫時間要準確,溫度要恒定以免出現假陽性。
(2)異丙醇試驗:
①17%異丙醇溶液配制后放置不宜過久,否則易出現假陰性。
②血紅蛋白液須新鮮。如保存較久,出現高鐵血紅蛋白,可形成假陽性。
③試劑要預熱,嚴格控制溫度以防假陽性。
④高HbF及G6PD缺乏的標本亦可出現陽性。
(3)紅細胞變性珠蛋白小體檢查:
①本試驗亦可用靜脈抗凝血做。
②孵育時間與不穩定血紅蛋白性質有關。一般1~2h即可出現明顯的藍色球形折光小體,但也有的不穩定血紅蛋白需更長時間的孵育。才出現典型的變性珠蛋白小體。
③制片后應及時計數,存放過久,則紅細胞內變性珠蛋白小體消失。如不能及時計數,可存放于干燥器或37℃溫箱。
④煌焦油藍染色后不能用伊紅美藍染色液復染,復染后可減少計數結果。
⑤變性珠蛋白小體需與網織紅細胞鑒別。前者包涵體呈較大圓形,均勻,彌散沉淀,整個紅細胞基質消失,而且需培育10min以上才逐漸清晰。而網織紅細胞在血液與煌焦油藍混合后數分鐘內顯示出網狀沉淀,紅細胞基質完整。
4.10 相關疾病很赞哦!(92481)
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