01 用新亞甲藍對網織紅細胞(亞甲藍和新亞甲藍有什么區別)

怎么用亞甲藍染網織紅細胞

1、準備所需試劑和器材，包括亞甲藍染液、生理鹽水、顯微鏡、載玻片、蓋玻片等。

2、制備網織紅細胞懸液：將適量全血樣品加入生理鹽水中，輕輕搖晃，使紅細胞充分溶解。

3、滴加亞甲藍染液：將亞甲藍染液滴加到紅細胞懸液中，根據實驗要求確定染液用量。

4、混勻：輕輕搖晃試管，使紅細胞和染液充分混勻。

5、觀察和計數：將染色后的紅細胞懸液滴加到載玻片上，蓋上蓋玻片，用顯微鏡觀察并計數網織紅細胞的數量。

亞甲藍和靛胭脂染色區別

亞甲藍和靛胭脂在染色方面存在一些區別。

1. 成分：亞甲藍是一種化學指示劑，也被用作染料、生物染色劑和藥物。靛胭脂則是一種還原指示劑，同時也可作為生物染色劑。

2. 染色效果：亞甲藍的水溶液在氧化性環境中呈藍色，但在遇到諸如鋅、氨水等還原劑時會被還原成無色狀態。靛胭脂則主要用于氧化劑還原指示劑及生物染色劑，溶于水，但難溶于乙醇。

3. 化學結構：亞甲藍和新亞甲藍都是吩噻嗪鹽類的染色劑，具有相似的結構，但兩側芳環上的修飾基團略有不同。靛胭脂的化學結構與二者不同，是一種有機化合物。

總的來說，亞甲藍和靛胭脂雖然都是染色劑，但在成分、染色效果和化學結構等方面存在一些差異。

亞甲藍和新亞甲藍有什么區別

亞甲藍和新亞甲藍化學結構不一樣，是兩種不同的物質

新亞甲藍主要用于網織紅細胞（不成熟紅細胞）染色，有毒

亞甲藍雖然也可以對網織紅細胞染色（RNA），但更是一種藥物，能治療高鐵血紅蛋白血癥

網織紅細胞計數

網織紅細胞 Miller;窺盤法;儀器法

Key words:Reticulocyte;Miller ocular;Analyzer

網織紅細胞是骨髓最新被釋放到外周血的成熟紅細胞的前提紅細胞，同成熟紅細胞相比，其細胞內仍殘存小量的RNA（嗜堿性物質），是反映骨髓造血功能的早期指標。目前測定網織紅細胞的自動分析儀主要有：多參數流式細胞儀（FCM），某些全自動血液分析儀，如：Sysmex-R系列分析儀，Miles H3型血液分析儀，Coulter Maxm型分析儀，Abbott CD3500血液分析儀[1,2]。國內多采用顯微鏡目測法。現將Sysmex-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法的測定結果進行探討。

1 材料與方法

1.1 材料

(1)SYSMEX-R3500分析儀：日本希森美康株式會社生產。原裝試劑盒和質控物，批號分別是ZA9004，11130091。(2)COULTER MAXM 分析儀：美國COULTER 公司生產。原裝試劑盒和質控物，批號分別是109155，105379K。試劑盒由試劑A與試劑B組成，其主要成分分別是0.06%新亞甲藍與0.08%硫酸。(3)Miller窺盤法的試劑盒：由TONYAR DIAGNOSTICS.INC生產的ASK BCB Solution，批號A10。成分為焦油藍4 g/L與氯化鈉9 g/L。

1.2 方法

(1)SYSMEX-R3500分析儀測定原理：熒光染料堿性槐黃（或者全胺O）（Auramine O,AO）與網織紅細胞內RNA結合，以氬激光束為光源進行測定。操作步驟：混勻血液，直接測定網織紅細胞。(2)COULTER MAXM 分析儀測定原理：血液標本與新亞甲藍孵育活體染色，加入酸性試劑，使紅細胞內的血紅蛋白溢出，保存被染色的RNA于細胞內，細胞通過測定體積，高頻傳導性以及激光散射（VCS）而進行分析，測定出網織紅細胞。操作步驟：向A管加入4滴與50 μl血液標本，混勻，室溫16℃～30℃放置5 min～60 min.取A管液體2 μl于B管，加入試劑B液2 ml，等30 s，手動進樣檢測。(3)Miller窺盤法原理：煌焦油藍活體染色法。操作步驟：見全國臨床檢驗操作規程。為了重復性好，CV值較低，本次實驗采取了計數500個紅細胞內的網織紅細胞百分數。(4)測定SYSMEX-R3500，COULTER MAXM的批內，批間精密度，并與Miller窺盤法進行比較。分別用SYSMEX-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法對130份正常人標本進行網織紅細胞測定，方差分析統計結果

一位熟練的檢驗工作人員對同一標本用Miller窺盤法重復測定15次，結果如下：均值=1.177 5(0.52～1.89)，S=0.321 9，CV(%)=27.34。

2.7 用SYSMEX-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀，顯微鏡目測法(Miller窺盤法)同時測定130份血常規在正常范圍的標本。結果F=3.87，P<0.05，差異有顯著性。差異性分析(見表6)，相關性分析(見表7)。表6 差異性分析（略）表7 直線相關性分析（略）注：※差異無顯著性，★差異有顯著性，★★差異有極顯著性，△相關。

試述網織紅細胞的形態結構特點、正常值和意義

網織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞，在周圍血液中的數值可反映骨髓紅細胞的生成功能，因而對血液病的診斷和治療反應的觀察均有其重要意義。

網織紅細胞是紅細胞的前身。骨髓中紅細胞系統的增生發育過程是：多  網織紅細胞

能干細胞→單能干細胞→原始紅細胞→早幼紅細胞→中幼紅細胞→晚幼紅細胞→網織紅細胞→成熟紅細胞。從原始紅細胞增殖到晚幼紅細胞階段共分裂3－4次，約需72小時，紅細胞數由一個變為8一16個，細胞核由大變小而濃縮，胞漿中含血紅蛋白逐漸增多。晚幼紅細胞以后細胞即不再分裂，發育過程中核被排出而成為網織紅細胞。網織紅細胞含有少量核糖核酸RNA)，用煌焦油藍染色時成網狀故名網織紅細胞。網織紅細胞進一步成熟，RNA消失而為成熟紅細胞。從晚幼紅細胞發育到成熟紅細胞約需48小時，成熟紅細胞的壽命約為120天。在正常情況下骨髓中有核紅細胞并不釋放至血循環，只有網織紅細胞和成熟紅細胞才釋入血中。因此，檢查末梢血中網織紅細胞數，可以推知骨髓生紅細胞的情況。網織紅細胞（以下簡Retc）是反映骨髓紅系造血功能以及判斷貧血和相關疾病療效的重要指標。過去，計數Retc十分麻煩費時也不易數準，ADVIA120儀器最大的優點之一是隨時可計數Retc,十分便利，而且計數的細胞多，故很準確。該儀器對Retc可提供6個參數，包括網織紅細胞總數（Retic#）、網織紅細胞百分比（Retic%）、網織紅細胞平均體積（MCVr）、單個網織紅細胞平均血紅蛋白濃度（CHCMr）、網織紅細胞分布寬度（RDWr）、單個網織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）等，其中意義最大的，除了總數，百分比以外，最重要的網織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）參數。現講述于下：Retc是剛脫去核尚殘留有少量RNA的未完全成熟的紅細胞。正常人外周血中甚少，如增加，表示紅系統增生（如急性溶血，多數溶血性貧血和其他增生性貧血），如貧血仍不見增生，可能是重型再障。抗貧血治療后明顯上升，表示治療有效，反之效果欠佳。故網紅的總數或百分比對貧血的臨床診斷及療效觀察非常有價值。是血液最常做的項目之一。

編輯本段網織紅細胞計數

  (一)原理 網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的紅細胞,胞質中尚有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質殘存,經煌焦油藍或新亞甲藍活體染包后,胞質中可見藍或藍綠色枝點狀甚至網織狀結構。   (二)方法 活體染色法.近年來還可通過某些血液自動分析儀及流式細胞術檢測法進行網織紅細胞計數。   (三)參考值(活體染色法)   成人 0.5%--1.5%   新生兒 3%-6%   網織紅細胞絕對值(24-84)×109/L   (四)臨床意義

編輯本段網織紅細胞增高

  (1)提示骨髓造血功能旺盛 見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血,尤以溶血性貧血時增加最為顯著,常>10%。   (2)缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后,可見網織紅細胞明顯增加。

編輯本段網織紅細胞減低

  提示骨髓造血功能低下,見于再生障礙性貧血。

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